吳茱萸次堿對小鼠神經行為障礙的改善作用及行為學實驗方法

本文研究了吳茱萸次堿（Evodiamine, EVO）對脂多糖（LPS）誘導的小鼠神經炎癥及行為障礙的改善作用，重點介紹了行為學實驗的方法與結果。研究發現，EVO通過調控C/EBP-β-COX2軸，有效減輕LPS誘導的神經炎癥，進而改善小鼠的認知記憶功能及焦慮樣行為。

神經炎癥在神經退行性疾病的發生發展中扮演重要角色。LPS作為一種細菌毒素，能夠誘導強烈的神經炎癥反應，導致小鼠出現認知記憶障礙及焦慮樣行為。吳茱萸次堿（EVO）是從傳統中藥吳茱萸中提取的一種生物堿，具有顯著的抗炎和神經保護作用。北京工業大學高月教授等研究團隊發表研究文獻。

文章來源：https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.139597

材料與方法
實驗動物與分組

選用健康成年C57BL/6小鼠，隨機分為四組：對照組、LPS模型組、EVO低劑量治療組（0.5 mg/kg）和EVO高劑量治療組（2 mg/kg）。每組小鼠數量根據實驗設計確定，確保統計效力。

藥物處理與模型建立

LPS模型組及EVO治療組小鼠通過腹腔注射LPS（5 mg/kg）建立神經炎癥模型。對照組小鼠注射等量生理鹽水。EVO治療組在LPS注射前30分鐘通過口服給藥方式給予相應劑量的EVO，連續給藥7天。

行為學實驗方法

曠場實驗（Open Field Test, OFT）

設備：曠場實驗箱（50 cm × 50 cm × 40 cm），底部劃分為25個等大的方格，中央區域為9個方格。

曠場實驗分析系統，XR-XZ301，上海欣軟

方法：將小鼠置于實驗箱中央，記錄5分鐘內小鼠在中央區域的活動時間、總移動距離及進入中央區域的次數。使用VisuTrack軟件自動追蹤并分析小鼠行為。

評價指標：中央區域活動時間、總移動距離、進入中央區域次數，反映小鼠的探索行為和焦慮水平。

高架十字迷宮實驗（Elevated Plus Maze Test, EPM）

設備：高架十字迷宮，由兩條開放臂和兩條閉合臂組成，臂長50 cm，寬10 cm，高15 cm（閉合臂有透明墻壁）。迷宮離地面高度為50 cm。

方法：將小鼠置于迷宮中央區域，頭朝開放臂，記錄5分鐘內小鼠在開放臂和閉合臂中的停留時間及進入次數。使用VisuTrack軟件自動追蹤并分析小鼠行為。

評價指標：開放臂停留時間比例、開放臂進入次數比例，反映小鼠的焦慮水平

新物體識別實驗（Novel Object Recognition Test, NOR）

設備：曠場實驗箱，內放置兩個相同物體（熟悉物體）供小鼠探索。

新物體識別實驗，XR-XX117，上海欣軟

方法：訓練階段，將小鼠置于實驗箱中自由探索兩個熟悉物體10分鐘。24小時后進行測試階段，將其中一個熟悉物體替換為新物體，記錄小鼠在5分鐘內對新物體和舊物體的探索時間。

評價指標：新物體探索時間比例，反映小鼠的認知記憶能力。

行為學實驗結果顯示，LPS模型組小鼠在曠場實驗中央區域活動時間減少，高架十字迷宮開放臂進入次數和停留時間比例下降，新物體識別實驗中新物體探索時間比例降低，表明LPS成功誘導了小鼠的焦慮樣行為和認知記憶障礙。而EVO治療組小鼠的上述行為指標均顯著改善，且高劑量組效果更為顯著，表明EVO能夠有效緩解LPS誘導的神經行為障礙。

本文通過曠場實驗、高架十字迷宮實驗和新物體識別實驗等方法，證實了EVO對LPS誘導小鼠神經行為障礙的改善作用。EVO通過調控C/EBP-β-COX2軸，減輕神經炎癥，進而改善小鼠的認知記憶功能及焦慮樣行為。本研究為EVO在神經退行性疾病治療中的應用提供了科學依據。

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