廣東
近日，山東農業大學園藝科學與工程學院包志龍教授、馬方放教授團隊在番茄褪綠病毒（Tomato chlorosis virus, ToCV）研究領域取得突破，成功構建了可直接侵染番茄的ToCV高效侵染體系，相關研究成果以“Integrating the tomato chlorosis virus with the tobacco rattle virus facilitates the direct infection of tomato”為題，發表于《Plant Physiology》期刊，為抗ToCV番茄育種提供了全新技術支撐。園藝科學與工程學院已畢業2026屆博士王歌（現為聊城大學講師）、已畢業碩士卞玉梅以及在讀研究生劉碩和孫鳳澤為論文共同第一作者，包志龍教授、馬方放教授為論文共同通訊作者。
該研究將ToCV的全基因組（包括RNA1和RNA2）分別克隆并整合到弱毒煙草脆裂病毒（Tobacco rattle virus, TRV）載體pTRV2GW中，構建了ToCV侵染性克隆。研究人員將pTRV1、pTRV2GW-RNA1和pTRV2GW-RNA2的農桿菌懸浮液等體積混合，通過無針注射器侵染番茄子葉，成功實現了ToCV對番茄的直接侵染。RT-PCR、Western blot及透射電鏡檢測證實，侵染后番茄植株中可檢測到ToCV的ORF3和ORF10，且葉片中出現明顯的病毒顆粒聚集，表明侵染體系構建成功。進一步研究發現，接種該侵染性克隆的番茄植株表現出ToCV典型病害癥狀，與自然侵染癥狀完全一致。該體系可高效用于番茄抗ToCV資源的快速篩選，有效區分易感番茄品種與抗病野生番茄資源。
該研究借助弱毒TRV載體復制效率高、宿主范圍廣的優勢，攻克了傳統ToCV侵染性克隆不能直接侵染番茄的技術難題，建立起簡便高效的病毒侵染體系。擺脫了對煙粉虱傳毒和嫁接接種的依賴，操作更簡便、周期更短，可為ToCV致病機理研究提供有效技術手段；同時本研究建立的弱毒病毒載體整合外源病毒基因組技術策略，也為其他缺乏侵染性克隆的病毒研究提供了參考思路。
論文鏈接：
https://doi.org/10.1093/plphys/kiag260
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